本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的血管內皮生長因子 C（VEGF-C）濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于淋巴管生成、淋巴回流、腫瘤淋巴轉移及淋巴組織修復研究等領域。
產品名稱 |
大鼠血管內皮細胞生長因子Celisa試劑盒 | 英文名稱 | VEGF-C ELISA Kit |
貨號 | CS-5360E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 VEGF-C 抗體。
結合：加入標準品或樣本，VEGF-C 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 VEGF-C 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
血清：無熱源無菌采血管采集，杜絕溶血、脂血污染；1000×g 離心 10 min 分離上清，-20℃分裝保存，嚴禁反復凍融。血漿：選用 EDTA / 檸檬酸鹽 / 肝素抗凝管采血混勻，離心去除血細胞取上清備用（部分試劑盒慎用肝素）。細胞上清：收集后 1000×g 離心 10 min 去除細胞碎片與雜質，-70~-80℃低溫保存。組織勻漿：預冷生理鹽水 / PBS 冰上制備勻漿，高速離心取澄清上清，-20℃避光分裝貯存。
2. 通用注意事項
1) 樣本嚴禁添加疊氮鈉（NaN?），會抑制 HRP 酶活性，導致顯色失效。
2) 所有樣本避免室溫久置，全程低溫操作，防止蛋白降解。
3) 溶血、渾濁、微生物污染樣本直接廢棄，干擾抗體抗原結合。
4) 細胞上清、低豐度指標樣本務必設置復孔，校正實驗誤差。
5) 檢測濃度超標時，僅用試劑盒配套稀釋液稀釋，匹配基質體系。
操作步驟：
1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣：設空白孔、標準品孔、樣品孔，每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本，封板溫育。
3.溫育反應：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結合。
4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標記抗體，封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數：加終止液終止反應，顏色由藍變黃；立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算：以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線，換算樣本待測指標濃度。
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