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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿中的抗心肌抗體（AMA）濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于自身免疫性心肌病、心肌炎及心血管自身免疫病研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：大鼠抗心肌抗體(AMA)elisa試劑盒

英文名稱：AMA ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5716E

檢測(cè)原理：

大鼠抗心肌抗體 (AMA) ELISA 試劑盒的原理是?間接法?，通過(guò)固相載體包被抗原，捕獲樣本中特異性抗體，再用酶標(biāo)記的二抗進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

?固相化?：微孔板預(yù)先包被心肌組織抗原。

?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，AMA 抗體與固相抗原結(jié)合。

?檢測(cè)?：加入 HRP 標(biāo)記的抗大鼠 IgG 二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。

?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

?測(cè)定?：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。

5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說(shuō)明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說(shuō)明書（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說(shuō)明書為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測(cè)定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。