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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的水通道蛋白 3（AQP-3）濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于皮膚水代謝、腎小管水甘油轉(zhuǎn)運(yùn)、上皮滲透壓調(diào)節(jié)及黏膜屏障研究等領(lǐng)域。

核心原理：

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 AQP-3 抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，AQP-3 被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入化的抗大鼠 AQP-3 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本類型與處理

?血清?：使用無(wú)熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。

?細(xì)胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。

?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。

2. 注意事項(xiàng)

樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。

細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測(cè)波動(dòng)，建議設(shè)復(fù)孔。

操作步驟：

1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說(shuō)明書稀釋配制。

2.設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔，精準(zhǔn)加樣后封板。

3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應(yīng)，結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。

4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復(fù)洗板 3–5 次，去除未結(jié)合雜質(zhì)。

5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結(jié)合物，再次 37℃溫育。

6.重復(fù)洗板流程洗凈游離酶標(biāo)抗體，保證背景干凈。

7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍(lán)色清晰顯現(xiàn)。

8.加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃，即刻用酶標(biāo)儀讀取 OD 值。

9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算，得出樣本目標(biāo)物質(zhì)濃度。

公司正在出售的產(chǎn)品：