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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專(zhuān)用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、腦組織勻漿、神經(jīng)組織提取物及細(xì)胞上清液中的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 4（NT-4）蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋對(duì)應(yīng)梯度區(qū)間，靈敏度達(dá)對(duì)應(yīng)檢出限值，適用于神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)元存活、神經(jīng)損傷修復(fù)及退行性神經(jīng)系統(tǒng)疾病等研究領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)elisa試劑盒

英文名稱(chēng)：NT-4 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5515E

檢測(cè)原理：

大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 4 (NT-4) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過(guò)固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 NT-4 抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，NT-4 被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入生物su化的抗大鼠 NT-4 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。

?洗滌?：棄去液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。

?加檢測(cè)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。

?洗滌?：同步驟3。

?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。

?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。

?檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min；濃縮洗滌液按說(shuō)明書(shū)稀釋混勻。

2.設(shè)孔加樣設(shè)空白、標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣品孔，精準(zhǔn)加樣，封板。

3.溫育結(jié)合37℃孵育 30–60 min，棄液拍干。

4.洗板加滿(mǎn)洗滌液浸泡，甩干拍干，重復(fù)3–5 次。

5.加酶結(jié)合物除空白孔外每孔加 HRP 標(biāo)記液，封板 37℃孵育。

6.再次洗板充分洗凈未結(jié)合游離酶，控干殘留液體。

7.顯色避光加顯色液 A/B，避光 37℃顯色 10–15 min。

8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后，立刻酶標(biāo)儀讀 OD 值。

9.結(jié)果計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)擬合，換算樣本濃度。