產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞膜蛋白提取物及細(xì)胞上清液中的腎上腺素能 a1A 受體(ADRA1A)蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋對(duì)應(yīng)梯度區(qū)間,靈敏度達(dá)對(duì)應(yīng)檢出限值,適用于心血管調(diào)控、神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)、平滑肌收縮及內(nèi)分泌代謝等研究領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱:大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)elisa試劑盒
英文名稱:ADRA1A ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品貨號(hào):CS-5512E
檢測(cè)原理:

大鼠腎上腺素能 a1A 受體 (ADRA1A) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測(cè)。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 ADRA1A 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,ADRA1A 被固相抗體捕獲。
檢測(cè):加入生物su化的抗大鼠 ADRA1A 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實(shí)驗(yàn)步驟?:

?試劑準(zhǔn)備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復(fù)5次。
?加檢測(cè)抗體?:每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍(lán)變黃)。
?檢測(cè)?:450nm波長測(cè)定吸光度(OD值),15分鐘內(nèi)完成。
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關(guān)鍵實(shí)操技巧:

1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統(tǒng)一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝;時(shí)間嚴(yán)格卡死,過長背景高、過短信號(hào)低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規(guī)范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復(fù)凍融;嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數(shù)
全避光;整板顯色時(shí)長一致;加終止液立刻讀數(shù),放置越久數(shù)值漂移越大。
6.基礎(chǔ)質(zhì)控
樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復(fù)開蓋失效。